Cys- Ahx-K(5FAM) -Ahx-S(GfO)9-NH2
一、基本性质
中文名称：半胱氨酸 - 氨基己酰 - 赖氨酸 (5 - 羧基荧光素标记)- 氨基己酰 - 丝氨酸 -(甘氨酸 - 苯丙氨酸 - 羟脯氨酸)₉- 酰胺
英文名称：Cys-Ahx-Lys (5-FAM)-Ahx-Ser-(Gly-Phe-Hyp)₉-NH₂
三字母序列：Cys-Ahx-Lys (5-FAM)-Ahx-Ser-(Gly-Phe-Hyp)₉-NH₂
单字母序列：C-Ahx-K(5FAM)-Ahx-S-(GFO)₉-NH₂
结构特征：
N 端：Cys（可用于二硫键 / 偶联 / 固定化）
间隔区：Ahx（氨基己酸，6 碳疏水柔性臂）×2
荧光标记：Lys 侧链标记 5-FAM（5 - 羧基荧光素）
连接区：Ser
胶原模拟区：(Gly-Phe-Hyp)₉ = (GfO)₉
C 端：酰胺化 -NH₂（提高稳定性）
总长度：标记肽 + (GfO)₉ 共约 30 个氨基酸单元
分子量：约 3600–3800 Da（含 FAM）
等电点 pI：≈ 5.2–5.8（中性偏弱酸性）
荧光特性（5-FAM）：
激发波长 Ex：~494–495 nm
发射波长 Em：~518–520 nm
绿色荧光，适用于荧光成像、流式、酶标仪
溶解性：易溶于水、PBS、缓冲液、DMSO
稳定性：-20℃ 避光保存稳定，避光使用，避免反复冻
二、应用领域
胶原三螺旋形成、组装、解聚动力学研究
成纤维细胞摄取、胶原合成、细胞外基质沉积示踪
基质金属蛋白酶（MMP）、胶原酶活性检测与抑制剂筛选
胶原靶向药物递送、组织工程支架示踪
皮肤修复、抗衰、创面愈合、纤维化模型荧光成像
生物材料（水凝胶、胶原支架）降解与体内分布监测
整合素 / 胶原受体结合、细胞黏附与迁移可视化研究
三、应用原理
这条肽是双功能胶原模拟荧光探针：
(GfO)₉ 胶原模拟核心 高度模拟天然胶原蛋白的三螺旋结构，可自组装成胶原样结构，被细胞、基质、胶原酶识别。
5-FAM 荧光示踪 侧链标记的 FAM 不影响肽链主链构象，可实时定量、定位追踪多肽。
Ahx 柔性间隔臂 减少荧光团与胶原序列之间的空间位阻，保证受体 / 酶识别效率。
N 端 Cys 功能化位点 可用于：
二硫键结合
表面固定（芯片、微孔板、材料）
与蛋白 / 脂质 / 纳米载体偶联
5.C 端酰胺化 提高抗酶解稳定性，延长作用时间。
作用机理
三螺旋自组装 (GfO)₉ 自发形成稳定胶原三螺旋，模拟天然胶原构象。
受体识别与细胞结合 被成纤维细胞、角质形成细胞表面胶原受体识别、结合、内化。
荧光信号报告 FAM 荧光强度 / 偏振变化可反映：
多肽浓度
结合状态
三螺旋形成 / 解聚
酶切降解程度
4.胶原酶 / MMP 特异性降解 胶原降解酶切割胶原模拟区，破坏三螺旋并改变荧光信号，实现酶活定量检测。
5.ECM 整合与重塑示踪 可整合进入细胞外基质，直观显示胶原合成、降解、重塑全过程。
药物研发与材料应用
作为 MMP 活性荧光探针，用于抗肿瘤、抗纤维化药物筛选
胶原靶向成像探针，用于纤维化、肿瘤微环境、皮肤损伤可视化
组织工程支架、水凝胶、医用敷料的示踪与降解监测
化妆品 / 药品中促胶原合成、抗衰、修复成分的功效评价
可进一步修饰为靶向递送载体（利用 N 端 Cys 偶联药物 / 抗体）
研究进展
(GfO)₉ 是目前胶原模拟肽中三螺旋稳定性极强的序列
FAM 侧链标记（Lys (5-FAM)）不干扰三螺旋形成，是最常用的胶原示踪结构
带 N 端 Cys + 双 Ahx 间隔臂的设计，兼顾标记、偶联、柔性、识别四大功能
广泛用于胶原组装机制、细胞 - 基质相互作用、纤维化疾病、皮肤老化研究
相关案例分析
胶原三螺旋动力学 利用荧光偏振 / CD 光谱，实时监测温度、离子、pH 对 (GfO)₉三螺旋形成的影响，定量计算解链温度与稳定性。
成纤维细胞胶原摄取成像 荧光显微镜下实时观察多肽被细胞摄取、转运、分泌到基质的全过程，量化促胶原合成效果。
MMP 酶活高通量检测 多肽被胶原酶降解后荧光信号显著变化，可快速筛选 MMP 抑制剂，用于纤维化与肿瘤药物开发。
生物材料体内示踪 将多肽掺入胶原水凝胶，可在动物体内无创追踪材料降解、细胞浸润、基质再生，评价组织工程效果。