Circumsporozoite (CS) Protein Repetitive Sequences

一、基础信息

• 中文名称：疟原虫环子孢子蛋白重复序列肽
• 英文名称：Circumsporozoite (CS) Protein Repetitive Sequences
• 完整三字母序列：Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala
• 单字母全长序列：NPNA NPNA NPNA NPNA NPNA NPNA
• 氨基酸总数：24 aa
• 分子式：C96H146N36O37
• 分子量：2396.44
• 结构修饰：线性多肽，游离 N 端氨基、游离 C 端羧基；无乙酰、酰胺、二硫键、环化、特殊修饰残基。
• 结构式：

二、理化性质

1. 紫外定量：无 Tyr、Phe、Trp、Met，280 nm 无紫外吸收，需 BCA、Lowry、氨基酸分析法、茚三酮定量。
2. 稳定性：无易氧化残基、无光敏残基，常规避光即可；序列大量 Pro 形成多处刚性 β 转角，抗普通蛋白酶水解能力优于普通柔性多肽；无 Cys 不存在氧化聚合问题。
3. 酸碱特性：仅含中性亲水残基 Asn、Ala、Pro，整体近电中性；pH 6.5–7.6 PBS、免疫缓冲液、细胞培养液中稳定性佳。
4. 溶解性：高比例 Asn 亲水残基，水溶性极好，纯水、中性缓冲液常温快速溶解。
5. 空间构象：NPNA 重复单元形成规则刚性转角阵列，高度模拟疟原虫 CS 蛋白表面免疫优势重复表位天然构象。

三、来源背景

NPNA 是恶性疟原虫环子孢子蛋白（CS 蛋白）最核心的串联重复抗原区，为疟疾疫苗研究标志性表位；6 次重复是实验室最常用的多拷贝重复肽，免疫原性远高于单拷贝 NPNA，广泛用于疟疾免疫、疫苗、抗体筛选实验。

四、生物学功能

1. 强免疫原性 B 细胞优势表位，刺激机体产生高滴度抗疟原虫特异性抗体，是宿主中和子孢子、阻断肝细胞入侵的关键靶标。
2. 模拟天然 CS 蛋白重复区，介导疟原虫子孢子与肝细胞受体识别结合。
3. 多拷贝串联重复大幅提升抗原提呈效率，增强体液免疫应答。

五、科研应用

1. 疟疾疫苗研发：多表位疫苗构建、免疫原性评价、中和抗体效力检测。
2. 抗体制备：免疫动物制备 CS 蛋白特异性多抗 / 单抗，用于疟原虫检测。
3. 体外诊断试剂：作为标准抗原开发 ELISA、免疫层析疟疾检测试剂盒。
4. 寄生虫免疫机制：研究抗体中和、T 细胞应答、宿主抗疟保护机制。

六、溶解与储存规范

1. 溶解：pH7.2 无菌 PBS 或超纯水室温溶解，无特殊避光、隔氧要求。
2. 冻干粉：短期 - 20 ℃密封保存；长期分装后 - 80 ℃储存。
3. 工作液：单次分装避免反复冻融；2~8 ℃避光可稳定存放 7–10 天。