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无需纯化，直接在天然环境中玩转分子互作

news 2026/6/17 9:46:24

免纯化 MST 微量热泳动技术带你轻松拿下多种分子互作检测

艾普蒂生物｜一站式分子互作实验服务

01.免纯化 MST 技术简介

在生物分子相互作用研究中，不少科研人员常会遇到难题：目标蛋白表达纯化难度大，或是纯化后在标记过程中失活，导致分子互作实验难以开展。膜蛋白、低丰度蛋白、稳定性差的蛋白，更是实验路上的阻碍。

微量热泳动（Microscale Thermophoresis，MST）技术可有效解决以上问题。

技术原理

MST 依托热泳动物理现象：红外激光照射样品形成微观温度梯度场，荧光标记的靶分子会从高温区向低温区移动。当靶分子与配体结合后，分子尺寸、水化层、表面电荷等理化性质发生改变，热泳动行为也随之变化。设备通过检测荧光强度变化，监测分子热泳动差异，进而定量计算分子结合亲和力（Kd 值）。

传统 MST 虽优势突出（无需固定、样品用量少、适用场景广，可直接在细胞裂解液、血清等复杂样品中检测），但仍依赖高纯度蛋白。免纯化 MST 技术进一步突破限制：将目的蛋白与 GFP 等荧光蛋白融合，在细胞内瞬时表达后直接制备细胞裂解液即可上机检测，全程无需蛋白纯化，专为难表达、难纯化、稳定性差的蛋白研究设计。

02.免纯化 MST 技术基本流程

以 HEK293T 细胞瞬时表达体系为例，流程简单易操作：

载体构建：将目的蛋白基因与 GFP 标签融合，构建真核表达载体。

细胞转染与表达：把质粒转染至 HEK293T 细胞，培养 48–72 h，保证目的蛋白充分表达。

裂解液制备与 MST 实验：收集细胞并裂解，取上清液直接开展 MST 检测，无纯化步骤。

整套流程耗时短，从细胞转染到获取亲和力数据仅需数天，大幅节约时间与实验成本。

03.MST 的多样化应用场景

MST 适配绝大多数生物分子互作检测，覆盖蛋白、小分子、核酸、多肽、脂质体、纳米颗粒等，典型应用如下：

蛋白与小分子亲和力分析：适用于药物研发、信号通路研究。全程溶液自由态检测，无需固定蛋白，避免蛋白构象改变、结合位点被遮蔽等问题。

蛋白与多肽相互作用：针对细胞信号传导相关研究，样品消耗量低，可定量分析二者结合亲和力。

蛋白与蛋白结合动力学：抗原 - 抗体、分子伴侣 - 底物等互作均可检测，双分子均处于自由溶液状态，更贴近生理环境，适配构象敏感、稳定性弱的蛋白。

蛋白与核酸（DNA/RNA）结合检测：应用于基因表达调控研究，无需固定、特殊处理核酸，实验流程简洁。

蛋白与脂质体、纳米颗粒互作分析：适配药物递送系统、纳米生物材料研究，可处理大尺寸样品，实现精准亲和力定量。

难表达、难纯化蛋白互作筛选：专门解决膜蛋白、低丰度蛋白、易降解蛋白的实验难题，依托细胞裂解液直接检测，省去繁琐纯化流程。

该技术广泛应用于基础科研、药物靶点验证、候选药物筛选、疾病标志物筛查、生物材料开发等领域。

艾普蒂生物深耕分子互作领域多年，为您提供从蛋白表达纯化到微流控热泳动（MST）检测的一站式解决方案，让您无需在多个平台之间奔波，一次对接、全程托管、省心省力。

MST 技术核心优势一览

对比传统分子互作检测技术，MST 优势显著：

1.无需固定：溶液中自由检测，杜绝固定造成的蛋白构象改变，规避假阳性、假阴性结果。

2.样品消耗极少：单次检测仅需数微升样品，测定 Kd 值仅需纳克级样品，适配珍稀样品。

3.适用范围极广：可在细胞裂解液、血清、含去垢剂等复杂体系中直接检测，不受分子类型、溶液成分限制。

4.快速高效：单次完整检测仅需约 10 分钟，实验效率高。

5.无需纯化：免纯化方案打破传统实验壁垒，难纯化蛋白也可顺利开展互作实验。

一站式 MST 分子互作服务｜艾普蒂生物

艾普蒂生物深耕分子互作领域，提供从蛋白表达纯化到 MST 检测全流程一站式服务，全程托管，省心省力。

服务亮点

多系统蛋白表达与纯化拥有大肠杆菌、HEK293 细胞、CHO 细胞、昆虫细胞（杆状病毒表达系统）等多种表达体系，根据蛋白特性定制表达方案，提供高纯度、高活性目的蛋白。

专业 MST 微量热泳动检测搭载 Monolith 系列 MST 分子互作仪，支持常规 MST、免纯化 MST 两种模式，精准测定各类分子结合亲和力（Kd 值），数据专业可靠。
海量蛋白资源储备 6 万 + 种蛋白库存，常用靶点蛋白可直接调用，缩短项目周期。
丰富实战经验5 年行业经验，累计完成 3000 + 靶点检测，服务 2000 + 科研客户，技术成熟。
全流程闭环服务涵盖基因合成、载体构建、蛋白表达纯化、MST 实验设计、数据分析，实现 “样品进→数据出” 一体化服务。

服务覆盖场景