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Cecropin A ;KWKLFKKIEKVGQNIRDGIIKAGPAVAVVGQATQIAK-NH₂

一、基础信息

  • 中文名称:天蚕素 A
  • 英文名称:Cecropin A
  • 三字母序列:Lys-Trp-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Glu-Lys-Val-Gly-Gln-Asn-Ile-Arg-Asp-Gly-Ile-Ile-Lys-Ala-Gly-Pro-Ala-Val-Ala-Val-Val-Gly-Gln-Ala-Thr-Gln-Ile-Ala-Lys-NH₂
  • 单字母序列KWKLFKKIEKVGQNIRDGIIKAGPAVAVVGQATQIAK-NH₂
  • 氨基酸总数:37 aa
  • 分子式:C184H313N53O46
  • 分子量:4003.85
  • 结构修饰:线性多肽,C 端酰胺化 (-NH₂),N 端游离氨基;无二硫键、无环化、无 N 端乙酰、无特殊修饰氨基酸。
  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:含 Trp、Phe,280 nm 有紫外吸收,可直接紫外分光光度法测浓度。

2.稳定性

  • 无 Met、无 Cys,无氧化降解风险;Trp、Phe 属于光敏残基,全程避光操作储存;
  • 序列含 Pro 形成局部刚性转角;C 端酰胺修饰抵抗羧肽酶切割,提升多肽体内稳定性;
  • 整体两亲螺旋结构,水溶液易被蛋白酶降解,建议现配现用。

3.酸碱特性:大量碱性 Lys、Arg,搭配少量 Glu、Asp 酸性残基,整体呈弱碱性;pH 6.5~7.6 PBS、细菌培养液、细胞缓冲液稳定性良好。

4.溶解性:碱性亲水残基充足,水溶性优异,常温中性缓冲液可完全溶解。

5.空间构象:经典两段式两亲 α 螺旋,N 端阳离子亲水螺旋、C 端疏水螺旋,依靠电荷结合细菌细胞膜并造成膜穿孔,为核心活性构象。

三、来源背景

源自鳞翅目昆虫血淋巴的经典阳离子抗菌肽,微生物侵染后昆虫脂肪体大量合成释放;常与 Cecropin B 配对做构效对比,是抗菌肽、先天免疫领域标准工具肽。

四、生物学功能

  1. 广谱杀菌活性:强效杀灭革兰氏阳性、阴性菌,对多重耐药菌、部分真菌有效;破坏细菌磷脂双分子层,造成胞内物质泄漏致死。
  2. 低溶血特性:对哺乳动物正常细胞毒性极低,微生物靶向性强。
  3. 内毒素中和作用:抑制 LPS 诱导的促炎因子分泌,缓解细菌内毒素引发的炎症损伤。
  4. C 端酰胺修饰延长体液作用半衰期,体外 / 体内抗菌活性优于游离羧基同源肽。

五、科研应用

  1. 新型抗菌先导肽筛选:MIC/MBC 抑菌实验、杀菌动力学、序列改造优化活性。
  2. 细胞膜相互作用机制:脂质体、荧光标记实验解析肽 - 膜结合、穿孔分子机理。
  3. 昆虫先天免疫研究:免疫诱导、抗菌肽表达调控、细菌感染动物模型。
  4. 抗感染药效评价:体内菌血症、皮肤感染模型评估多肽保护效果。
  5. 构效对比实验:与 Cecropin A/B 进行活性、膜亲和力对照分析。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:无菌 pH7.2 PBS 或超纯水常温避光配制,现配现用。
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封保存;长期分装后 - 80 ℃储存。
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光密封可存放 5~7 天。
http://www.jsqmd.com/news/1036700/

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