Biotinyl-PYY (porcine, rat)
一、基础信息
- 中文全称:N 端生物素修饰猪 / 大鼠肽 YY
- 英文名称:Biotinyl-PYY (porcine, rat)
- 三字母序列:Biotin-Tyr-Pro-Ala-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Ser-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂
- 单字母序列:Bio-YPAKPEAPGEDASPEELSRYYASLRHYLNLVTRQRY-NH₂
- 氨基酸总数:36 aa
- 分子式:C190H288N54O57
- 分子量:4240.72
- 修饰说明:
- N 端修饰:Biotin(简写 Bio,生物素酰基);
- C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基端;
- 无焦谷氨酸、二硫键、环化、侧链修饰、乙酰化。
- 结构式:
二、理化性质
- 紫外检测:序列含多个 Tyr,280 nm 吸收强,可直接紫外分光光度法定量。
- 稳定性
- 无 Cys、Met,无氧化降解风险;大量 Tyr 属于光敏残基,配制、储存全程避光;
- 富含 Pro,形成多处刚性脯氨酸转角;N 端 Bio、C 端酰胺两端封闭,显著抵抗氨基肽酶 / 羧肽酶;长链易被内肽酶剪切,工作液建议现配现用。
3.酸碱性
酸性残基:Glu、Asp;碱性残基:Lys、Arg、His;整体弱酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、肠内分泌细胞培养基、血浆缓冲液。
4.溶解性
Ser、Asn、Gln 亲水骨架 + 大量带电氨基酸,水溶性良好,中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
中段多 Pro 柔性弯折,C 端形成特征 α 螺旋,C 端 Tyr-NH₂是 NPY/Y 受体结合核心区域;N 端生物素远离结合位点,不干扰肽与受体互作。
三、来源背景
PYY(Peptide YY)是肠道 L 细胞分泌的饱腹调节肽,猪、大鼠成熟 PYY 共用此全长保守序列;N 端偶联生物素作为亲和探针,用于受体互作、Pull-down、结合竞争实验。
四、生物学功能
- 优先激动 Y2、Y4 受体,强效抑制胃肠蠕动、胃酸与胰腺分泌;
- 延缓胃排空、抑制食欲,调控机体能量代谢与体重稳态;
- 调节肠道离子转运、内脏血流;
- 生物素标签可结合链霉亲和素,用于捕获膜受体、互作蛋白,不改变原有生物活性。
五、科研应用
- 亲和 Pull-down:富集细胞表面 Y 受体及下游结合蛋白;
- 受体竞争性结合实验,筛选 Y 受体拮抗剂 / 激动剂;
- 肥胖、食欲、肠道内分泌体外细胞模型;
- 荧光 / 化学发光示踪,观察受体内吞、组织分布;
- 胃肠激素代谢、中枢 - 外周摄食调控通路研究。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS,常温避光配制;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃密封避光;长期分装充氮气,-80 ℃避光保存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光可稳定存放 7 天。
