Tetradecapeptide (Biotinyl-Angiotensinogen (1-14) (porcine))
一、基础信息
- 中文全称：生物素酰基肾素底物十四肽（猪源血管紧张素原 1-14）
- 英文全称：Biotinyl-Renin Substrate Tetradecapeptide / Biotinyl-Angiotensinogen (1-14) (porcine)
- 三字母序列：Biotin-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Leu-Val-Tyr-Ser
- 单字母简写：Bio-DRVYIHPFHLVYTS
- 氨基酸数量：14 aa
- 分子式：C85H123N21O20
- 分子量：1759.05
- 结构修饰：
- N 端修饰：生物素 Biotin（简写 Bio/Biotinyl）；
- 线性多肽，C 端游离羧基，无酰胺、焦谷氨酸、二硫键、环化修饰；
- 侧链氨基酸均无额外标记。
- 结构式：
二、理化性质
1.紫外定量：含 Tyr、Phe，280 nm 紫外吸收强，可直接紫外分光光度法测定浓度。
2.稳定性要点
- 无 Cys、Met，无氧化降解风险；Tyr、Phe 为光敏残基，配制、储存全程避光；
- 含 Pro 形成局部刚性转角，N 端生物素封闭氨基端，抵抗氨基肽酶水解；水溶液仍易被肾素、ACE 等蛋白酶切割，建议现配现用。
3.酸碱特性
酸性残基：Asp；碱性残基：Arg、His；整体近中性偏弱酸性；pH 6.0–7.6 PBS、血浆模拟缓冲液、肾素酶反应缓冲液稳定性良好。
4.溶解性
Ser 亲水残基搭配酸碱带电氨基酸，水溶性优异，常温中性缓冲液可完全溶解。
5.空间构象
天然肾素酶识别底物构象，Leu-Leu 切割位点暴露，N 端生物素不影响肾素结合与酶切反应，用于亲和捕获检测酶切产物。
三、来源背景
截取猪源血管紧张素原 N 端 1–14 天然序列，N 端偶联生物素标签；是体外肾素酶活检测专用底物肽，区别于无标记十四肽，可借助链霉亲和素实现产物分离与定量。
四、生物学功能
- 特异性作为肾素（Renin）天然底物，肾素在 Leu¹⁰-Leu¹¹ 位点切割，生成血管紧张素 I（1–10）与 C 端 4 肽片段；
- 生物素标签不干扰肾素结合、酶切效率，酶切后完整底物与产物均可通过链霉亲和素固相捕获；
- 产物血管紧张素 I 可进一步被 ACE 转化为血管紧张素 II，参与升压通路。
五、科研应用
- 体外肾素酶活定量检测，高通量筛选肾素抑制剂；
- 链霉亲和素 Pull-down 分离酶切底物 / 产物，HPLC、ELISA 定量分析；
- 肾素 - 血管紧张素系统（RAS）通路机制研究；
- 对比无标记肾素底物，验证生物素修饰对酶动力学参数的影响；
- 高血压相关药物体外筛选模型。
六、溶解与储存规范
- 溶解：pH7.2 无菌 PBS 常温避光配制；
- 冻干粉：短期 - 20 ℃密封避光保存；长期分装 - 80 ℃避光储存；
- 工作液：单次分装避免反复冻融；2–8 ℃避光密封可存放 7–10 天。