Biotinyl-GRF (1-44) (ovine)
一、基础信息
- 中文全称：N 端生物素修饰绵羊生长激素释放激素全长 1-44 肽
- 英文全称：Biotinyl-Growth Hormone-Releasing Factor (ovine, 1-44)
- 三字母序列：Biotin-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Gly-Ala-Lys-Val-Arg-Leu-NH₂
- 单字母序列：Bio-YADAIFTNSYRKI LGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQEQGAKVRL-NH₂
- 氨基酸总数：44 aa
- 分子式：C221H368N72O66S
- 分子量：5121.87
- 结构修饰说明：
- N 端共价修饰生物素（Biotin / Bio）；
- C 端酰胺化 -NH₂，封闭羧基末端；
- 无环化、二硫键、焦谷氨酸、乙酰、侧链定点修饰。
- 结构式：
二、理化性质
1.紫外定量：含 Tyr、Phe、Met，280 nm 紫外吸收强，可直接紫外分光光度法定量。
2.稳定性要点
- 含 Met，极易氧化；溶解、分装全程冰浴，减少空气暴露；长期冻干粉分装充氮气隔氧保存；
- Tyr、Phe 为光敏芳香残基，配液、分装、储存全程避光；
- 无脯氨酸，整条肽链柔性高；N 端生物素、C 端酰胺两端封闭，可抵御氨基肽酶、羧肽酶，但 44 aa 长链易被内肽酶剪切，工作液现配现用。
3.酸碱特性
酸性残基：Asp、Glu；碱性残基：Arg、Lys；整体偏弱酸性；适配 pH 6.0–7.4 PBS、绵羊垂体原代细胞培养液、羊血浆缓冲体系。
4.溶解性
Thr、Ser、Asn、Gln 大量亲水残基搭配带电酸碱氨基酸，水溶性优异，中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
中段保守两亲 α 螺旋为 GHRH 受体核心识别区域；N 端生物素远离受体结合口袋，不干扰多肽与绵羊 GHRHR 受体结合亲和力。
三、来源背景
绵羊下丘脑分泌内源全长 GRF (1-44)，与人、猪序列多处位点突变；N 端偶联生物素作为绵羊专属亲和探针，用于反刍动物生长内分泌、垂体受体互作研究。
四、生物学功能
- 特异性激活绵羊垂体 GHRH 受体，强效刺激生长激素 GH 合成与释放；
- 调控绵羊生长速度、脂肪沉积、骨骼发育、泌乳相关内分泌稳态；
- 介导应激、采食、昼夜节律对 GH 分泌的调控；
- 生物素标签特异性结合链霉亲和素树脂，Pull-down 富集绵羊 GHRH 受体及下游互作信号蛋白，用于竞争性结合、细胞荧光示踪实验。
五、科研应用
- 绵羊原代垂体细胞 Pull-down，捕获绵羊 GHRHR 受体及结合蛋白；
- 反刍动物 GHRH 受体激动剂 / 拮抗剂体外筛选、竞争性结合实验；
- 肉羊生长调控、泌乳机制、垂体内分泌体外细胞模型；
- 人 / 猪 / 绵羊 GRF 跨物种序列、受体亲和力构效对比研究；
- 免疫荧光 / 化学发光示踪绵羊垂体、外周组织 GHRH 受体分布与内吞。
六、溶解与储存规范
- 溶解：pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制，缩短敞口时间降低 Met 氧化；
- 冻干粉：短期 - 20 ℃避光密封；长期分装充氮气隔氧，-80 ℃避光储存；
- 工作液：单次分装避免反复冻融；2~8 ℃避光存放不超过 3–5 天。