DARTS技术在中药复方靶标鉴定中的研究进展

中药复方（Traditional Chinese Medicine Formula）因具有多成分、多靶点和整体调控的特点，在疾病治疗中发挥着独特作用。然而，复杂的化学组成也使药物靶标鉴定成为中药研究的重要难题。传统"标记-钓取"方法需要提前确定活性成分，并完成探针修饰，但面对含有数千种化学成分的复方体系，实施难度较高。DARTS（药物亲和响应靶标稳定性）作为一种非标记（Label-free）技术，无需改变药物天然结构即可完成全蛋白分析，因此逐渐成为中药复方靶点筛选的重要技术。

DARTS技术通过检测药物结合蛋白后的稳定性变化寻找候选靶标。实验前通常需要对复方样品进行预处理，一般采用水溶后加入乙醇加热的方法去除多糖等杂质，提高活性组分纯度。随后，将提取物直接加入靶标细胞裂解液，使复方中的不同活性成分根据亲和力分别结合目标蛋白，从而提高蛋白抵抗蛋白酶降解的能力，实现靶标筛选。

相比LiP-MS，DARTS在复杂样本分析中具有流程更加简洁的优势。LiP-MS需要两步酶解，数据分析过程复杂，同时在真核细胞样本中容易受到高丰度蛋白干扰。DARTS则结合SDS-PAGE完成蛋白分离，可有效去除部分非特异性短肽，再结合高质量质谱分析，通常能够筛选出约50～200个潜在靶点蛋白，为后续GO功能富集分析及KEGG通路分析提供丰富的数据资源。

目前，中药复方作用机制研究多采用DARTS+MS开展初步筛选，再结合GO和KEGG分析寻找关键作用通路。例如，当某复方具有明确抗炎作用，而大量候选蛋白集中富集于NF-κB通路时，可进一步推测这些蛋白与药物发挥药效密切相关。随后结合成分分析，可进一步明确具体活性小分子及对应靶标，实现复方作用机制的深入解析。

除了质谱分析外，DARTS+WB也是常用的验证方法。该技术无需大型质谱设备，在普通实验室即可完成。通过比较不同蛋白酶浓度下实验组与对照组蛋白条带变化，可验证候选蛋白是否受到复方保护，从而进一步证明药物与目标蛋白之间存在直接物理结合，提高研究结果的可靠性。

达吉特DARTS技术服务文献（部分客户文献）：
[1]. Zhou J, Song Q, Li H, et al. Targeting circ-0034880-enriched tumor extracellular vesicles to impede SPP1highCD206+ pro-tumor macrophages mediated pre-metastatic niche formation in colorectal cancer liver metastasis. Mol Cancer. 2024;23(1):168. Published 2024 Aug 20. doi:10.1186/s12943-024-02086-9.(上海中医药大学附属曙光医院) IF=27.7
[2]. Zhang W, Song Y, Li C, et al. Canagliflozin Alleviates Diabetic Glomerular Endothelial Injury via Melibiose in a Microbiota-Dependent Manner. Adv Sci (Weinh). Published online May 27, 2026. doi:10.1002/advs.202517222.（郑州大学第一附属医院）IF=14.1
[3]. Yang X, Lin G, Chen Y, et al. Chlorquinaldol Alleviates Lung Fibrosis in Mice by Inhibiting Fibroblast Activation through Targeting Methionine Synthase Reductase. ACS Cent Sci. 2024;10(9):1789-1802. Published 2024 Aug 28. doi:10.1021/acscentsci.4c00798.（广州医科大学）IF=12.7
[4]. Liang Y, Zhang YL, Cheng TY, et al. Senkyunolide H potentiates bone marrow-derived mesenchymal stem cells therapy for liver cirrhosis by targeting MAEA to enhance ERK-driven HGF secretion. Pharmacol Res. 2026;226:108160. doi:10.1016/j.phrs.2026.108160.（上海中医药大学）IF=10.5
[5]. Zhao R, Lu Y, Xu Q, et al. Gut blautia coccoides-derived 5Z-dodecenoic acid attenuates chronic psychological stress-induced gastric cancer progression. Int J Surg. Published online November 20, 2025. doi:10.1097/JS9.0000000000004080.(中国人民解放军总医院第一医学中心) IF=10.3
[6]. Zhang S, Tang L, Pu Y, et al. Patchouli alcohol triggers autophagic cell death in non-small cell lung cancer cells through targeting GNAI1 to dissociate the GNAI1/ARRB1 complex. Int J Biol Sci. 2026;22(8):4004-4024. Published 2026 Mar 30. doi:10.7150/ijbs.125690.（中国上海市宝山区吴淞中心医院）IF=10.0