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Biotin-NTE-[Arg3]-Substance P;Bio-KYGGGGGGRPRPQQFFGLM-NH₂

一、基础信息

  • 英文全称:Biotin-NTE-[Arg3]-Substance P

  • 中文全称:生物素标记氨基端延伸臂 -[3 位精氨酸] 修饰 P 物质

  • 三字母序列:Biotin-Lys-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Pro-Arg-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH₂

  • 单字母序列:Bio-KYGGGGGGRPRPQQFFGLM-NH₂

  • 总氨基酸数量:19 aa

  • 分子式:C90H137N29O22S

  • 分子量:2009.33

  • 结构修饰说明

  1. N 端氨基共价偶联生物素;

  2. 氨基端延伸臂 NTE:Lys-Tyr-(Gly)₆,长甘氨酸柔性间隔,大幅消除生物素基团空间位阻;

  3. 活性母肽为 [Arg³]-Substance P:RPRPQQFFGLM;

  4. C 端 Met 酰胺化封闭羧基末端;无分子内二硫键、无环化结构。

  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:含 Tyr、双 Phe,280 nm 有稳定紫外吸收,可分光光度法定量;

2.稳定性要点

  • 序列含 Met 残基,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴、缩短敞口暴露空气时间;冻干粉长期保存需充氮隔氧;

  • Tyr、Phe 为光敏芳香残基,配液、储存全程避光;

  • N 端生物素 + C 端酰胺双重封端,抵御氨基肽酶、羧肽酶降解,但仍易被内肽酶切割,工作液现配现用;

3.电荷特性 碱性残基:Lys、多 Arg;无酸性氨基酸,整体强阳离子多肽;适配 pH 6.0–7.6 PBS、背根神经节、平滑肌、免疫细胞培养液;

4.溶解性 六聚甘氨酸柔性亲水臂搭配 Gln 极性残基,水溶性极佳,中性缓冲液常温快速溶解;

5.空间构象 长链 (Gly)₆间隔臂将生物素与 NK1 受体结合核心区完全分隔,几乎无空间干扰,配体与 NK1 受体结合活性接近天然肽。

三、生物学背景

[Arg3]-Substance P 是 P 物质高亲和力改造类似物,特异性靶向 NK1 受体,介导痛觉传导、神经炎症、平滑肌收缩;NTE 长柔性臂生物素标记版本专门用于高活性要求的受体结合、Pull-down 实验,避免短连接臂带来的结合抑制。

四、生物学功能

  1. 高选择性激动 NK1 受体,参与痛觉过敏、神经源性炎症、气道 / 肠道平滑肌收缩、免疫细胞活化;

  2. 调控中枢与外周痛信号、偏头痛、皮肤炎症、内脏痛通路;

  3. 长甘氨酸间隔臂降低标签位阻,保留完整激动活性;生物素结合链霉亲和素,用于靶受体富集与示踪。

五、科研应用

  1. 原代背根神经节、肠平滑肌、气道上皮细胞 Pull-down 捕获 NK1 受体及下游信号蛋白;

  2. NK1 受体拮抗剂 / 激动剂高通量竞争结合筛选;

  3. 慢性疼痛、神经炎症、偏头痛、肠易激综合征体外细胞模型;

  4. 对比短连接臂 / 无连接臂生物素 P 物质,研究标签空间位阻对配体亲和力的影响;

  5. 免疫荧光、流式示踪细胞膜 NK1 受体分布、内吞。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,减少空气接触防止 Met 氧化;

  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;

  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3 天,功能实验现配现用。

http://www.jsqmd.com/news/1227619/

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