黏膜糖蛋白亲和钓靶探针|生物素-粘蛋白 Biotin-Mucin

生物素 - 粘蛋白（Biotin-Mucin） 通过酰胺键 / LC 柔性连接臂修饰蛋白多肽骨架游离氨基，最大限度保留天然高度糖基化修饰、串联重复序列、完整聚糖表位；融合黏液屏障糖蛋白特性与生物素 - 链霉亲和素超高富集系统，用于亲和垂钓粘蛋白结合蛋白，搭配荧光链霉亲和素实现细胞、组织切片荧光示踪，是解析宿主 - 微生物互作、肿瘤黏液微环境、黏膜屏障调控机制的核心糖蛋白探针。

一、基础信息与理化性质

中文名称：生物素 - 粘蛋白

英文名称：Biotin-Mucin（可定制 MUC1、MUC2、猪胃粘蛋白等）

母体来源：猪胃黏膜 / 重组表达 MUC1（天然粘蛋白 CAS：84775-24-4）

分子量：天然粘蛋白 200 kDa ~ MDa 级别

稳定性：冻干固体稳定；规避高温、强酸强碱，防止多肽骨架水解、聚糖链断裂；避免糖苷酶降解糖链。

结构式：

二、核心合成与偶联机制

化学偶联原理：粘蛋白分子表面含有丰富的氨基（如赖氨酸残基的ε-氨基）。在生化实验中，常使用 NHS-Biotin（N-羟基琥珀酰亚胺生物素）作为偶联试剂。NHS酯结构中的活性羧基在温和的缓冲体系（如 pH 7.4 的 PBS 缓冲液）中，可与粘蛋白表面的伯胺发生高选择性的亲核反应，生成稳定的酰胺键，并释放 NHS 副产物。

纯化与验证：反应后，通常需要通过透析等方式去除未结合的游离生物素。所得产物可通过 HABA-Avidin 竞争结合法、SDS-PAGE 或质谱等方法来评估每个粘蛋白分子上的生物素标记密度（修饰度）。

三、应用领域

粘蛋白结合蛋白钓获（Mucin-binding proteins）

黏膜/肠道类器官界面研究

糖链互作竞争 assay

MUC1 肿瘤相关

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