ANF (4-28) (human, canine) ;RSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY
一、基本信息
- 英文全称:ANF (4-28) (human, canine)
- 中文全称:人 / 犬源心房利钠因子(4-28 片段),心房钠尿肽 (4-28)
- 三字母序列:Arg-Ser-Ser-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr
- 单字母序列:RSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY
- 氨基酸总数:25 aa
- 分子式:C112H177N39O35S3
- 分子量:2726.07
- 结构修饰:分子内二硫键 Cys4 ↔ Cys20;形成特征环状结构;无 N 端生物素标记、无 C 端酰胺修饰。
- 结构式:
二、理化性质
- 紫外吸收:序列含有 Phe、Tyr,支持 280 nm 紫外吸收定量;
- 氧化敏感性:含有 Met 残基以及一对形成二硫键的半胱氨酸,极易氧化;水溶液避免长时间敞口接触空气,冻干粉避光保存,严格分装,规避反复冻融;实验溶液建议现配现用。
- 电荷特征:生理 pH 7.4 环境下,包含多个 Arg 碱性残基、Asp 酸性残基,整体带正电荷;适配 pH6.5~7.4 无菌 PBS 缓冲液、细胞培养液。
- 溶解性:大量极性亲水氨基酸,中性水环境溶解性良好;不可使用强酸强碱溶解。
- 构象特点:依靠 Cys4-Cys20 二硫键构建 ANP 保守环状活性区,二硫键一旦断裂,环状构象消失,多肽受体结合活性大幅下降;相比 ANF (7-28),N 端多出 Arg-Ser-Ser 三个氨基酸,用于研究 N 端延伸序列对多肽稳定性、受体亲和性的调控作用。
三、生物学背景
该肽是人、犬 ANF (1-28) 天然截短变体。心房利钠因子(ANP/ANF)主要由心房心肌细胞合成释放,主导机体利尿、利钠、血管舒张、抑制交感神经、降压、拮抗肾素 - 血管紧张素 - 醛固酮系统。
ANF 的环状区域是结合 NPR-A/NPR-B 受体核心区域,N 端延伸序列能够影响多肽体内代谢半衰期、蛋白酶抗性以及空间构象。常与 ANF (1-28)、ANF (7-28) 搭配开展构效关系平行实验。
四、生物学功能
- 保留完整受体结合环状结构,特异性结合钠尿肽受体 NPR-A、NPR-B;
- 体外可诱导血管平滑肌舒张、促进内皮细胞信号激活,调控水盐代谢相关通路;
- 用于探究 N 端 Arg-Ser-Ser 序列对多肽抗酶解能力、受体亲和力的影响。
五、科研应用
- 心房钠尿肽 SAR 构效关系对照实验(全长 1-28 / 4-28 /7-28 三组对比);
- 心血管生理学、高血压、心衰相关体外细胞功能实验;
- 钠尿肽受体相互作用、分子结合模型研究;
- 多肽稳定性、血浆蛋白酶降解实验,筛选多肽药物改造位点。
六、溶解与储存规范
- 溶解方式:优先使用无菌 pH7.2 PBS 配制;禁止添加 DTT、β- 巯基乙醇等还原剂,防止破坏二硫键;
- 冻干粉储存:短期密封 - 20℃避光保存;长期分装后 - 80℃储存;
- 工作液:避免反复冻融,2~8℃存放不超过 5 天。
