AF594标记的Streptavidin，一种基于生物素-链霉亲和素体系的AF405荧光探针

【试剂简介】

英文名称：Streptavidin, AF594 conjugate，AF594 Streptavidin，AF594标记的Streptavidin，Alexa Fluor594 Streptavidin

中文名称：AF594标记的链霉亲和素，链霉亲和素偶联AF594，链霉亲和素,AF594偶联物

【链霉亲和素AF594偶联物的特性与应用】

链霉亲和素（Streptavidin）是一种来源于阿维丁链霉菌的蛋白质，对生物素（biotin）具有极高的亲和力与特异性。当链霉亲和素与荧光染料Alexa Fluor 594（AF594）共价结合后，形成的偶联物成为一种用于检测与定位的高特异性工具。以下从多个方面对其进行分析说明。

一、 结构与作用原理

链霉亲和素由四个相同的亚基组成，每个亚基均可结合一个生物素分子。其与生物素的结合具有解离常数极低、结合速度快且不易受pH值或温度变化影响的特点。AF594是一种磺化罗丹明衍生物，具有较高的荧光量子产度与光稳定性。通过化学偶联，AF594分子被共价连接到链霉亲和素蛋白上，形成稳定的复合物。该复合物保留了链霉亲和素对生物素的高亲和力，同时具备了AF594的荧光特性。

二、 光学特性

AF594的最大激发波长约为590纳米，最大发射波长约为617纳米，处于橙红色光谱区域。该染料的荧光强度较高，且对光照漂白具有相对较强的耐受性，适合需要较长时间观察的实验。由于激发波长与常见荧光染料如FITC或DAPI分离度较好，便于进行多色标记与同时检测。

三、 主要应用方向

检测分析：在基于生物素-链霉亲和素系统的检测体系中，该偶联物可用于检测已标记生物素的靶分子。例如，在固相分析中，通过生物素化的识别分子捕获目标物，再利用本偶联物进行荧光信号生成与读取。

显微成像：在荧光显微镜技术中，可用于对生物素标记的细胞结构或分子进行定位与可视化。其发射波长适合大多数常规荧光显微镜滤光片配置。

流式分析：在流式细胞术中，可用于检测细胞表面或内部经生物素标记的靶点，实现对特定细胞群的鉴定与分析。

印迹技术：在蛋白质或核酸印迹实验中，作为生物素标记探针的荧光检测试剂，提供一种化学发光法之外的替代性检测方案。

四、 使用注意事项

避光操作：荧光偶联物对光敏感，建议在操作和储存过程中尽量减少曝光。

优化浓度：实际使用中需通过实验确定最佳工作浓度，避免因浓度过高导致非特异性结合背景，或浓度过低导致信号不足。

缓冲液兼容性：链霉亲和素在较宽的pH和离子强度范围内保持活性，但应避免含有游离生物素或变性剂的缓冲体系。

样品准备：待测样品中的靶分子需已有效标记生物素，且生物素化步骤不应显著影响识别分子的结合能力。

五、 与其他方法的比较

与酶标链霉亲和素相比，荧光偶联物无需底物孵育步骤，操作更为简便，且适用于动态或快速检测。与其他荧光链霉亲和素偶联物（如FITC、Cy3）相比，AF594的光稳定性通常优于许多传统染料，且其发射光谱与生物样本的自发荧光重叠较少，有助于提高信噪比。

【相关试剂】

Streptavidin, AF555 conjugate；AF555-链霉亲和素偶联物

355115-41-2；Dansylamidoethyl Methanethiosulfonate

HRP WGA；辣根过氧化物酶标记小麦胚芽凝集素

Biotin-diSulfo-Cyanine3 Tyramide；生物素-双磺酸-花菁染料CY3-酪胺

Biotin WGA；生物素标记小麦胚芽凝集素

CF640R WGA；CF640R Wheat germ agglutinin

Alexa Fluor 647 Wheat germ agglutinin

AF 647 标记小麦胚芽凝集素

Streptavidin, Alexa Fluor532 conjugate；Alexa Fluor532 链霉亲和素偶联物

Alexa Fluor 430 Wheat germ agglutinin；AF 430 标记小麦胚芽凝集素

Cal-520-Biocytin Conjugate；钙离子荧光探针Cal520生物胞素偶联物

Streptavidin, CF680R conjugate；CF680R-Streptavidin；链霉亲和素, CF680R偶联物

Biotin-PSMA；生物素-PSMA

iFluor 647 酪胺（iFluor 647 Styramide） * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*

【注意事项】

1.产品仅限用于科研实验，不用于临床和诊疗。

2.在使用过程中，也需要避免频繁解冻，保持干燥、避光和避氧气。

文章编辑来源：WWH