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单细胞质量控制常见指标的解读学习

常见指标 是什么?
nFeature_RNA 一个细胞表达了多少种不同的基因
nCount_RNA 一个细胞里检测到的所有RNA分子(UMI)总数
percent.mt 细胞中线粒体基因的RNA占比
percent.HB 细胞中血红蛋白基因的RNA占比

屏幕截图 2026-01-21 114129

nFeature_RNA(左上图)

判断细胞质量和是否异常。

  • 值很低:可能是“空壳”细胞(液滴里没有细胞),或濒死的低质量细胞。
  • 值异常高:可能是两个细胞被错误地包裹在一起,即“双细胞”。

通常呈正态分布(中间高,两边低)。我们会保留中间大部分“技能”适中的合格细胞,剔除两端过高或过低的异常细胞。

nCount_RNA(右上图)

判断细胞活性和大小,并辅助发现异常。

  • 量太低:细胞可能不活跃或质量差。
  • 量异常高:同样提示可能是“双细胞”。
    它的分布通常和nFeature_RNA很相似

和nFeature_RNA联合观察。合格细胞应处于一个合理的“工作量”区间。

percent.mt(左下图)

细胞的“疲劳指数”,判断细胞中线粒体基因的RNA占比(这是最重要的细胞状态指标)。
比例过高,强烈提示细胞可能处于:

  • 应激状态
  • 凋亡(程序性死亡)中
  • 已经死亡
    (这些细胞必须剔除,否则会严重影响后续分析结果)

*越低越好:不同组织有不同阈值,但通常超过5%-20%​ 就会被认为质量不佳。图中大部分细胞此值很低,说明样本整体活性很好。

percent.HB(右下图)

样本的“污染指数”,判断细胞中血红蛋白基因的RNA占比。

检测并剔除红细胞污染:在分析非血液组织(如肿瘤、大脑、肝脏)时,如果混入了破裂的红细胞,它们的基因会污染数据,必须清除。

http://www.jsqmd.com/news/278575/

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