AbMole小讲堂丨Concanamycin A (Con A)：V-ATP酶抑制剂在自噬、肿瘤和动物实验中的应用
Concanamycin A (Con A，Folimycin，刀豆素A，AbMole，M7737) 是一种大环内酯类化合物，作为V-ATP酶（液泡型ATP酶）的特异性抑制剂，在基础研究中被广泛应用。其作用机制主要涉及抑制V-ATP酶的质子泵功能，从而干扰细胞器酸化及依赖pH的细胞活动。Concanamycin A可诱导溶酶体、胞内体等酸性细胞器的pH值升高，进而影响蛋白质降解、自噬体成熟及离子稳态。Concanamycin A 在 0.1 μM 浓度下即可显著抑制V-ATP酶活性，如在黑色素瘤细胞（A375、SK-MEL-28）中抑制H⁺泵功能[1]。
在HEK293细胞中，Concanamycin A（0.1 μM）通过阻断自噬体-溶酶体融合，增加自噬相关的囊泡积累。在前列腺癌细胞（LNCaP、22Rv1）中，Concanamycin A（刀豆素A，10 nM）联合其他抑制剂（如Enzalutamide ）可协同降低雄激素受体（AR）信号通路的活性[1]。Concanamycin A（CAS No.：80890-47-7）在原代AML细胞（患者来源）中呈现剂量依赖性的抗增殖与促凋亡效应（剂量范围：10–100 nM）[2]。Concanamycin A还能以0.1 μM的浓度在小鼠成骨细胞中抑制溶酶体酸化，降低组织蛋白酶B的活性[3]。Concanamycin A(Con A，Folimycin，刀豆素A，AbMole，M7737) 在大鼠模型中，静脉注射（剂量为1 mg/kg）可用于研究V-ATP酶对CD36蛋白亚细胞循环的调控，并揭示其在心肌脂质代谢紊乱中的作用。
Int J Mol Sci. 2021 Aug 16;22(16):8779.
华南师范大学的科研人员使用了AbMole的Protein Synthesis IN-1 (AbMole, M4879) 、MG132 (AbMole, M1902) , Concanamycin A (Con A，Folimycin，刀豆素A，AbMole，M7737) 。实验人员研究了植物在缺铁条件下，自噬途径如何介导ESCRT组件中FREE1的降解。研究发现：FREE1是植物ESCRT复合物的特有成分，在缺铁时会被转运到液泡中降解，泛素化的FREE1蛋白的液泡转运由自噬途径介导。自噬缺陷突变体（atg5-1和atg7-2）积累更多的FREE1蛋白，并对缺铁表现出超敏反应，在缺铁条件下，自噬相关基因上调，促进FREE1的自噬降解，从而可能减轻FREE1对铁吸收的抑制作用。Protein Synthesis IN-1作为蛋白质合成抑制剂，用于追踪FREE1蛋白的半衰期和降解过程。Concanamycin A 是一种液泡H+-ATP酶抑制剂，能显著阻断CHX处理后FREE1蛋白水平的下降，表明FREE1主要通过液泡依赖机制降解。
Autophagy-dependent degradation of FREE1.
参考文献及鸣谢
[1] Costa, G. A.; de Souza, S. B.; da Silva Teixeira, L. R.; et al. Tumor cell cholesterol depletion and V-ATPase inhibition as an inhibitory mechanism to prevent cell migration and invasiveness in melanoma.Biochimica et biophysica acta. General subjects2018,1862(3), 684-691.
[2] Bartaula-Brevik, S.; Leitch, C.; Hernandez-Valladares, M.; et al. Vacuolar ATPase Is a Possible Therapeutic Target in Acute Myeloid Leukemia: Focus on Patient Heterogeneity and Treatment Toxicity.Journal of clinical medicine2023,12(17).
[3] Uhlman, A.; Folkers, K.; Liston, J.; et al. Effects of Vacuolar H(+)-ATPase Inhibition on Activation of Cathepsin B and Cathepsin L Secreted from MDA-MB231 Breast Cancer Cells.Cancer microenvironment : official journal of the International Cancer Microenvironment Society2017,10(1-3), 49-56.