PACAP (6-38) (human, ovine, rat)
一、基本信息
- 名称：PACAP (6–38) (human, ovine, rat)
- 简称：PACAP(6-38)
- 三字母序列：Phe-Thr-Asp-Ser-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-Gly-Lys-Arg-Tyr-Lys-Gln-Arg-Val-Lys-Asn-Lys-NH₂
- 单字母序列：FTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVLGKRYKQRVKNK-NH₂
- 对应全长：PACAP-38 第 6–38 位片段
- 长度：33 个氨基酸（33-mer）
- 修饰类型：C‑末端酰胺化（‑CONH₂）
- 末端：N‑NH₂，C‑CONH₂
- 结构特征：
- 含1 个 Met、3 个 Tyr、1 个 Phe
- 无 Cys，无二硫键
- 两亲性 α‑螺旋结构
- 种属：人、绵羊、大鼠序列完全一致
- 结构式：
二、精确理化性质（可直接用于 COA / 质谱）
- 精确分子量：4024.81 Da
- 分子式：C182H300N56O45S
- 理论等电点 pI：9.9（强碱性多肽）
- pH 7.4 净电荷：+7
- 紫外吸收：280 nm 强吸收（Tyr、Phe）
- 溶解性：易溶于水、稀醋酸、PBS、DMSO
三、稳定性
- 含Met，易氧化，必须避光保存
- C‑端酰胺化提高稳定性与抗酶解能力
- 粉末：−20 ℃ 避光干燥 ≥ 2 年
- 溶液：分装避光 −20 ℃，避免反复冻融
四、作用靶点与药理特性（核心重点）
4.1 主要作用靶点（受体谱）
主要作用于PACAP/VIP家族G蛋白偶联受体（GPCR），对各受体的亲和力与选择性如下：
- PAC1受体（PACAP-R1）：高亲和力（Ki值≈0.1–1 nmol/L），竞争性拮抗剂，对PAC1受体的选择性略高于VPAC受体，是研究PAC1受体介导效应的首选工具肽
- VPAC1受体（VIP-R1）：中高亲和力（Ki值≈1–10 nmol/L），竞争性拮抗剂，可阻断VIP对VPAC1受体的激活作用
- VPAC2受体（VIP-R2）：中高亲和力（Ki值≈1–10 nmol/L），竞争性拮抗剂，广泛分布于中枢神经系统和外周组织，可阻断PACAP和VIP的相关效应
4.2 作用机制（拮抗剂核心原理）
- 竞争性结合：PACAP (6–38) 保留与受体结合的完整结构域，可与PACAP-27、PACAP-38、VIP竞争结合受体的相同结合位点，且结合亲和力不低于激动剂
- 无激动活性：因缺失N端1–5位激活核心区（该区域是受体激活、启动信号通路的关键），结合受体后无法激活G蛋白（Gs、Gq），不诱导胞内cAMP升高、Ca²⁺浓度变化等信号反应
- 阻断效应：通过占据受体结合位点，阻止激动剂与受体结合，从而抑制激动剂介导的所有生物学功能，实现“特异性阻断”，是研究PACAP/VIP生理功能的“金标准”拮抗剂
4.3 药理优势
- 特异性高：仅作用于PAC1/VPAC1/VPAC2受体，无其他受体交叉反应
- 亲和力强：Ki值处于nmol/L级别，用量低、效果显著，适合细胞实验和动物实验
- 跨物种通用：人、绵羊、大鼠序列一致，可直接用于不同物种的实验，无需单独优化
- 稳定性好：C端酰胺化修饰提升抗酶解能力，体内给药后半衰期较长，适合动物在体实验
五、核心生物学功能与实验应用场景
PACAP (6–38) 本身无直接生物学效应，核心功能是作为“工具肽”，特异性阻断PACAP/VIP介导的信号通路，用于鉴定、验证PACAP/VIP的生理/病理功能，具体应用场景如下：
5.1 神经科学研究
- 神经保护机制验证：阻断PACAP受体，验证PACAP在脑缺血、创伤性脑损伤、帕金森病、阿尔茨海默病中的神经保护作用是否由PAC1/VPAC受体介导
- 痛觉与偏头痛研究：作为对照肽，阻断PACAP信号，观察痛觉阈值、偏头痛模型的症状变化，明确PACAP在痛觉传导中的作用
- 神经可塑性与学习记忆：阻断PACAP受体，研究其对海马长时程增强（LTP）、学习记忆形成的影响，明确PACAP的神经调控功能
- 应激与情绪调节：用于下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）研究，阻断PACAP信号，观察应激反应、焦虑、抑郁相关行为的变化，验证PACAP在应激调节中的作用
5.2 内分泌与代谢研究
- 垂体激素分泌调控：阻断PACAP受体，观察生长激素（GH）、催乳素（PRL）、促肾上腺皮质激素（ACTH）等激素的分泌变化，明确PACAP对垂体功能的调节作用
- 胰腺功能研究：阻断PACAP信号，验证PACAP对胰岛素、胰高血糖素、胰酶分泌的调控作用，用于糖尿病、胰腺功能障碍的机制研究
- 代谢稳态调节：研究PACAP在葡萄糖代谢、脂肪代谢中的作用，通过阻断受体，观察体重、血糖、血脂的变化，为肥胖、代谢综合征研究提供工具
5.3 心血管与胃肠道研究
- 心血管调节：阻断PACAP受体，验证PACAP的血管舒张、正性肌力、心肌保护作用，用于心力衰竭、缺血再灌注损伤的机制研究
- 胃肠道功能：观察阻断PACAP信号后，胃肠蠕动、胃酸分泌、肠道黏膜屏障的变化，明确PACAP在胃肠生理中的调控作用，用于炎症性肠病、功能性胃肠病研究
5.4 免疫与炎症研究
- 抗炎机制验证：阻断PACAP受体，观察促炎因子（TNF-α、IL-6）、抗炎因子的表达变化，明确PACAP的抗炎作用是否依赖PAC1/VPAC受体
- 免疫调节：研究PACAP对巨噬细胞、T细胞、B细胞功能的影响，通过阻断受体，验证其免疫调节效应的分子机制
5.5 药物研发与标准品应用
- 药物筛选：作为PACAP/VIP受体拮抗剂筛选的阳性对照肽，用于新型拮抗剂、变构调节剂的筛选与活性验证
- 标准品应用：
- 检测类标准品：ELISA、RIA（放射免疫分析）、Western Blot、免疫组化实验的标准参照肽，用于定量检测样本中PACAP的含量
- 受体结合实验：Radioligand Binding（放射性配体结合）、SPR（表面等离子体共振）、ITC（等温滴定量热）实验的参照肽，用于测定受体与配体的结合亲和力