HSA：FcRn中和抗体筛选化学发光检测试剂盒：FcRn-lgG半衰期延长工程化抗体筛选
新生儿Fc受体（FcRn）是一种由FCGRT基因编码的Fcγ受体与β2-微球蛋白（B2M）组成的异源二聚体蛋白。FcRn在超过25种组织中表达，脾脏和肠道中水平最高，其核心功能是结合并保护单体免疫球蛋白G（IgG），通过回收IgG并将其再循环至血液循环中，从而显著延长IgG的半衰期。此外，FcRn还参与血清白蛋白（HSA）的稳态调节。在胎盘组织中，FcRn介导母体IgG向胎儿的主动转运，为新生儿提供被动免疫。
FcRn的这一独特生物学功能使其成为药物开发的双重靶点：一方面，通过工程化改造治疗性抗体的Fc区以增强其对FcRn的亲和力，可延长抗体半衰期，提高药效——例如用于治疗COVID-19的抗体鸡尾酒Evusheld以及TNF-α/Fc融合蛋白Enbrel，均利用了FcRn介导的再循环机制。另一方面，在自身免疫性疾病中，致病性自身抗体是疾病进展的关键驱动因素。阻断FcRn与IgG的相互作用，可加速包括致病性自身抗体在内的总IgG清除。基于这一策略，首个靶向FcRn的药物efgartigimod已获FDA批准用于治疗重症肌无力，为这一治疗路径提供了概念验证。
为满足研究人员在FcRn靶向药物筛选中的需求，由艾美捷代理的BPS Bioscience 公司推出的 HSA:FcRn 中和抗体筛选化学发光检测试剂盒（货号：82151）提供了一套完整、灵敏、高通量兼容的解决方案。该试剂盒专门用于筛选和表征能够阻断人血清白蛋白（HSA）与人FcRn相互作用的中和抗体或阻断剂，适用于自身免疫病治疗药物及半衰期延长型抗体药物的早期发现。
图1：HSA:FcRn中和抗体筛选化学发光检测试剂盒工作原理示意图。
一个96孔板或384孔板被FcRn蛋白包被。封闭后，用封闭剂或中和抗体对板进行预孵育。随后与生物素-HSA孵育，用链霉亲和素-HRP处理板，然后加入ELISA ECL底物以产生化学发光，该化学发光可使用化学发光仪进行测量。化学发光信号与HSA与FcRn的结合成比例。
一、试剂盒核心组分与设计优势
1. 即用型完整组分，操作简便
试剂盒提供所有必需成分：
生物素化人血清白蛋白（Biotinylated HSA）：作为配体。
重组人FcRn蛋白（FCGRT/B2M）：包含FCGRT的24-297位氨基酸及B2M的21-119位氨基酸，保留天然结合活性。
链霉亲和素-辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）：用于化学发光检测。
检测缓冲液及洗涤缓冲液：优化反应条件，降低背景。
用户无需额外准备蛋白或酶，即可直接开展实验。
2. 化学发光检测，高灵敏度与宽动态范围
本试剂盒采用化学发光ELISA原理：将FcRn蛋白包被于微孔板，加入生物素化HSA和待测中和抗体（或阻断剂）。如果抗体能阻断HSA与FcRn的结合，则后续结合的Streptavidin-HRP减少，化学发光信号降低。发光强度与HSA-FcRn结合程度成正比，与中和抗体的活性成反比。化学发光法具有背景低、信噪比高、不受化合物自发荧光干扰等优点，特别适用于复杂样本的筛选。
3. 96孔/384孔双规格，兼容高通量筛选
试剂盒提供96孔（100次反应）和384孔（400次反应）两种规格，可与自动化移液工作站无缝对接，实现高通量筛选（HTS）。用户可在单次实验中完成数百至数千个候选抗体或化合物的初筛，快速识别能够阻断HSA-FcRn相互作用的中和抗体。
4. 内置阳性对照（可选）与严格质控
虽然产品描述中未明确列出阳性对照抗体，但试剂盒设计允许用户使用已知的FcRn阻断剂（如efgartigimod或工程化Fc片段）作为阳性对照，以验证实验体系的有效性。BPS Bioscience可提供推荐对照品。
二、应用场景与科研价值
1. 自身免疫病治疗性中和抗体的筛选
FcRn抑制剂通过加速致病性IgG的清除，已在重症肌无力、寻常型天疱疮、免疫性血小板减少症等自身免疫病中显示出临床潜力。利用该试剂盒，研究人员可以：
筛选能够阻断HSA-FcRn相互作用的单克隆抗体、纳米抗体或小分子化合物。
对阳性克隆进行亲和力成熟和表位竞争分析。
测定候选药物的IC50，比较不同阻断剂的效力。
2. 延长治疗性抗体半衰期的工程化筛选
通过Fc区突变（如M252Y/S254T/T256E，即YTE突变）增强抗体对FcRn的亲和力，可显著延长抗体半衰期，减少给药频率。该试剂盒可用于：
评估工程化Fc变体与FcRn的结合能力（使用生物素化HSA作为竞争配体）。
筛选具有高亲和力但不阻断HSA结合的Fc变体（因为HSA与IgG结合FcRn的位点部分重叠但不同，需要根据具体设计选择）。
优化双特异性抗体或Fc融合蛋白的Fc区序列。
3. 药物联合应用的机制研究
FcRn不仅结合IgG，也结合HSA。一些疾病状态下（如肾病综合征）白蛋白水平异常，可能影响FcRn的药物转运功能。利用该试剂盒，可以研究：
病理浓度的HSA对FcRn-IgG结合的竞争影响。
同时靶向IgG和HSA结合位点的双功能阻断剂的协同效应。
三、技术参数与操作要点
规格与储存
检测格式：化学发光（96孔或384孔板）。
物种：人源。
靶点：HSA 与 FcRn (FCGRT/B2M)。
运输温度：-80°C（干冰）。
稳定性：按照指示储存（各组分保存条件详见说明书），试剂盒在收货后6个月内保持最佳性能。
监管状态：仅限研究使用（Research Use Only），不可用于临床诊断。
操作流程概述（典型步骤）
1. 包被：将FcRn蛋白稀释于包被缓冲液，加入微孔板，4°C过夜或37°C孵育2小时。
2. 封闭：加入封闭缓冲液，室温孵育1小时。
3. 加样：同时加入生物素化HSA和梯度稀释的待测中和抗体（或阻断剂），室温孵育1-2小时。
4. 检测：加入Streptavidin-HRP，室温孵育30分钟；洗涤后加入化学发光底物，立即读取发光值。
5. 数据分析：计算抑制率，拟合IC50曲线。
注意事项
避免反复冻融：FcRn蛋白和生物素化HSA应分装保存于-80°C，避免多次冻融导致活性下降。
DMSO兼容性：如果筛选小分子化合物，确保终浓度DMSO不超过1%（通常可兼容）。
阳性对照：强烈建议使用已知阻断剂（如efgartigimod或抗FcRn抗体）作为阳性对照，以监控实验质量。
非特异性结合：设置无FcRn包被的对照孔，评估待测抗体的非特异性结合。
四、文献参考
Chaudhury C., et al., 2006 Biochemistry. 45 (15): 4983-90.
Dall'Acqua W.F., et al., 2002 J Immunol. 169(9): 5171-80.
Sand K.M.K., et al., 2014 J Biol Chem. 289 (24):17228-39.