纯化正常兔IgG，DEAE层析+免疫电泳双重质控

一、产品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的纯化正常兔lgG（5mg/ml）（货号：P120-101）为从正常兔血清中分离纯化的总免疫球蛋白G（IgG），经离子交换层析纯化，未偶联任何标签或标记物。正常兔IgG广泛用作免疫检测实验中的阳性对照、同型对照或封闭试剂，用于评估非特异性背景或验证实验体系的有效性。本产品浓度为5 mg/ml，缓冲液为含叠氮化钠的磷酸盐缓冲液（PBS），可在2–8°C稳定保存2年。

二、关键规格

参数 | 详细信息

物种 | 兔

表位标签 | 无

同型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 纯化（非亲和纯化，采用分级分离+DEAE层析）

浓度 | 5 mg/ml

保存条件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收货后2年

缓冲液 | 磷酸盐缓冲液（PBS），含0.09%叠氮化钠

三、产品形式与组成

本品以液体形式提供，溶于磷酸盐缓冲液（PBS），pH 7.2–7.4，并加入0.09%叠氮化钠作为防腐剂。总蛋白浓度为5 mg/ml（基于IgG在280 nm处吸光系数A280 = 1.4，1 mg/ml IgG）。包装规格未明确列出，通常根据订单提供不同体积（如1 mg、5 mg、10 mg等），请以实际产品标签为准。

四、生产与纯化工艺

纯化方法

本产品通过分级分离（fractionation） 结合DEAE（二乙氨乙基）离子交换层析从正常兔血清中分离获得。该工艺可有效去除血清中的白蛋白、其他球蛋白（IgA、IgM）及非蛋白组分，获得高纯度的总IgG。

浓度测定

采用比尔定律（Beer’s Law）测定蛋白质浓度，设定1 mg/ml IgG在280 nm波长处的吸光度为1.4。根据实际测得的A280值计算浓度：

浓度（mg/ml）= A280 / 1.4

五、质量控制：免疫电泳验证

为确认产品纯度和免疫学特性，生产商对纯化产物进行了免疫电泳分析，结果表明：

1. 与抗兔IgG特异性血清反应：证实该产物为兔IgG。

2. 不与抗兔IgA或抗兔IgM血清反应：排除了IgA和IgM的污染，表明纯度良好。

3. 与抗兔全血清反应产生单一沉淀弧：该沉淀弧与抗IgG血清产生的沉淀弧一致，进一步确认产物仅为IgG，无其他血清蛋白残留。

六、储存与稳定性

保存条件：2–8°C，严禁冷冻。反复冻融会导致蛋白变性、聚集或活性丧失。

有效期：自收货之日起2年，在未受污染且正确储存条件下。

防腐剂：0.09%叠氮化钠可抑制微生物生长。注意：叠氮化钠对HRP有抑制作用，如用于HRP检测系统，请确保充分洗涤；如需去除叠氮化钠，可使用脱盐柱或透析。

七、ELISA阳性对照

1. 用PBS将本产品稀释至1–10 µg/ml，100 µl/孔包被ELISA板，4°C过夜。

2. 洗涤、封闭后，加入稀释后的抗兔IgG-HRP二抗（如1:5000）。

3. 孵育后洗涤，加底物显色。应出现明显阳性信号。

八、同型对照（流式细胞术）

1. 将本产品与实验一抗稀释至相同浓度（如2 µg/ml）。

2. 分别取等体积对照抗体和实验抗体，加入至不同样本管中，4°C孵育30分钟。

3. 洗涤后加入荧光标记的抗兔IgG二抗，检测信号。同型对照管应给出背景荧光水平。

九、相关产品推荐

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本产品为经过严格质控的纯化正常兔IgG，浓度高、纯度高、稳定性好，是免疫学实验中可靠的对照试剂。