博奥龙Hybridoma Feeder添加因子（含常见问题解答及客户评价）

01、什么是饲养层细胞？

在体外细胞培养中，对于一些难以生长或数量稀少的目的细胞（如杂交瘤细胞），需要辅助支持。通常的做法是预先在培养器皿底部铺上一层活细胞（如原代细胞或静息的肿瘤细胞），这层细胞即为“饲养层细胞”。

作用原理

1.提供生长因子

饲养层细胞能分泌必要的生长因子，促进目的细胞的增殖。

2.减轻毒性作用

有助于减轻培养器皿表面对细胞的毒害或不良应激。

02、传统饲养细胞的困境

常规方法是使用从小鼠腹腔提取的巨噬细胞或脾脏细胞作为饲养层，但该方法存在明显缺陷：

操作繁琐，易污染：操作步骤多，增加了微生物污染的风险。

效果不稳定：即使由同一操作者处理不同的小鼠，或不同操作者处理同一只小鼠，所得饲养细胞的效果也存在差异，重复性差。

难以标准化：无法建立稳定、统一的标准化操作程序（SOP），影响实验结果的可靠性。

违背动物福利：每次制备均需处死小鼠，不符合“3R”动物福利原则。

03、更优解决方案：Hybridoma Feeder 添加因子

Hybridoma Feeder 添加因子 是一种成分明确、即用型的适应性培养基，能够完全替代传统的饲养层细胞，有效解决上述所有问题。

核心优势

应用场景

本品专为单克隆抗体制备流程优化，有助于提升关键步骤的成功率：

产品问答

🙋：这几款试剂有什么区别？

👇

🙋：一个96孔板需要多少杂交瘤添加因子？

👉 以CM-2001为例每孔所需培养基约是200ul，96孔，大概是20ml，按1:10比例，大概使用杂交瘤添加因子2ml，加上不同客户用量不同，大概1个96孔板大概用杂交瘤添加因子1-2ml

🙋：杂交瘤添加因子，在融合阶段、半换液的时候是否需要添加？

👉 推荐一直添加

🙋：博奥龙Hybridoma Feeder添加因子买的两瓶颜色不同是为什么？还能用吗？

👉 颜色差异是因为咱们冻存液与添加因子中都含有酚红，在分装的过程中，液体与大气中的CO2反应变酸，从而会导致颜色的变化，属于正常现象，对产品质量没有影响，可以正常使用

客户评价——竞品的对比数

方法

用生长对数期SP2/0细胞与小鼠脾细胞以PEG为融合剂进行细胞融合。融合后细胞用含有竞品试剂和待测细胞融试剂的培养基RPMI1640培养基铺板，在37℃，5%CO2条件下静止培养同一批融合细胞，在融合后11天观察细胞，统计克隆形成孔数，计算克隆形成率，评价细胞融合试剂在不同培养基中的融合的效果。

结论

博奥龙Hybridoma Feeder添加因子与进口竞品细胞融合试剂在1640培养基中支持融合后杂交瘤细胞形成克隆效果相近，无明显差异。

方法

使用含10%FBS和添加因子的IMDM，DMEM和RPMI1640培养基，于24孔培养板中接种杂交瘤细胞10000cells/孔/ml，培养72小时进行细胞计数统计，评价待测Hybridoma Feeder添加因子和竞品细胞融合试剂对细胞增殖的效果

结论

① 竞品和待测细胞融合试剂都具有明显的促细胞生长效果，IMDM培养基中表现最好。
② 待测细胞融合试剂促细胞生长效果会稍优于竞品细胞融合试剂。