AF488标记的Streptavidin，AF488-链霉亲和素：一种基于生物素系统的荧光检测工具
【试剂简介】
英文名称：Streptavidin, AF488 conjugate，AF488 Streptavidin，AF488标记的Streptavidin，Alexa Fluor488 Streptavidin
中文名称：AF488标记的链霉亲和素，链霉亲和素偶联AF488，链霉亲和素,AF488偶联物
【AF488标记链霉亲和素的特性与应用】
链霉亲和素是一种从链霉菌中分离纯化的蛋白质，对生物素（维生素H）具有极高的亲和力与特异性。其结合作用快速、牢固且不易受外界环境因素干扰，这一特性使其成为多种检测与分析体系中重要的桥梁分子。AF488（Alexa Fluor 488）是一种水溶性的荧光染料，其最大激发波长接近488 nm，发射光位于绿色光谱范围。该染料具有较高的摩尔消光系数与量子产率，光稳定性较好，同时对pH变化相对不敏感。
将AF488染料通过稳定的化学键共价连接到链霉亲和素上，所得的复合物——AF488标记的链霉亲和素，结合了二者各自的功能特性。
一、 主要技术特性
高亲和力结合：该复合物完整保留了链霉亲和素对生物素的特异性识别与结合能力，其解离常数通常在10^-14至10^-15 M数量级，形成的复合物非常稳定。
荧光信号特性：AF488染料提供了明亮的绿色荧光信号。其激发光谱与488 nm激光光源匹配良好，适合使用配备氩离子激光器或相应LED光源的荧光显微镜、流式细胞仪及激光共聚焦扫描显微镜进行观测。
信噪比表现：由于链霉亲和素与生物素结合的高特异性，使用该复合物进行检测时，非特异性背景结合通常较低，有助于获得较高的信噪比。
稳定性：在适当的储存条件下（避光、低温），该标记产物在较长时间内能保持其结合活性与荧光强度。
二、 主要应用方向
该复合物主要用于基于生物素-链霉亲和素系统的信号放大与检测体系，其应用不限于以下方面：
免疫检测：在基于固相载体（如酶标板、膜）的检测中，一抗或靶标分子可通过生物素化进行标记。随后，AF488标记的链霉亲和素可作为通用型荧光检测试剂，与生物素结合，从而对目标进行定位与示踪。
细胞或组织标记：对于细胞表面或内部已生物素化的目标分子，可使用该复合物进行荧光标记，以便通过荧光成像技术进行观察与记录。
核酸检测：在荧光原位杂交（FISH）或核酸印迹实验中，对生物素标记的核酸探针进行检测时，可使用该复合物产生荧光信号。
流式细胞分析：用于检测细胞表面或胞内生物素化的分子，实现对特定细胞群体的荧光标记与分选分析。
蛋白印迹与蛋白检测：在膜上检测生物素化的蛋白质或其他分子时，该复合物可作为荧光显色试剂。
三、 实验考量因素
工作浓度优化：实际使用中需通过预实验确定最佳工作浓度，以平衡信号强度与背景水平。
光源与滤光片配置：需确保仪器具有匹配的激发光源（如488 nm）和适用于AF488发射光谱的滤光片组。
避光操作：实验过程中建议尽量减少样本的光照时间，以降低荧光淬灭的可能性。
封闭与洗涤：充分的封闭与洗涤步骤对于降低非特异性背景至关重要。
生物素化程度：待检分子上生物素的标记效率会影响最终信号的强度。
四、 质量控制指标
合格的产品通常需经过多项分析验证，主要包括：
蛋白浓度与染料/蛋白分子比（D/P值）的精确测定。
活性测定，确保其与生物素结合的能力未在标记过程中受损。
纯度分析，如通过SDS-PAGE或高效液相色谱进行评估。
无菌及内毒素水平控制（如适用于相关应用）。
五、相关试剂推荐
AF488标记人血白蛋白，Alexa Fluor 488-HSA
HMSiR-Carbamate-DBCO，HMSiR-Carbamate-Dibenzocyclooctyne
AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)
WSP-5，Washington State Probe-5
1593024-78-2
AF 488 TFP ester，Alexa Fluor488 TFP ester
5-HMSiR-NHS，5-HMSiR-N-Hydroxysuccinimide Ester
2680607-40-1
2133404-55-2
AF488 Phalloidin；AlexaFluor 488 Phalloidin；AF488 鬼笔环肽
AF 488 C5 Mal；Alexa Fluor 488 C5 Maleimide
AF 488 C5 马来酰亚胺
AF488 azide，AF488 N3
1200693-84-0
AF488 aldehyde，AF488 CHO
AF 488 LEL；AF 488标记的番茄凝集素
Spacer 9 Amidite，DMT-Tri(ethylene glycol)
146668-73-7
AF 488 CTB；AF 488 重组霍乱B亚基
CAL Fluor Red 610 Amidite，CAL Fluor Red 610 Phosphoramidite
AF488 Cadaverine；Alexa Fluor 488 Cadaverine；AF488 尸胺
温馨提示：产品仅用于科学研究
本文编辑来源于：WWH。