引言：那个决定实验成败的“隐形关口”
在生命科学研究和生物制药开发中，有一道几乎每个研究者都必须跨越的关口——转染。无论是做基因沉默、过表达，还是制备重组蛋白、开发细胞治疗产品，能否将外源核酸或蛋白质高效、安全地递送到靶细胞内，往往直接决定了整个实验的走向。而这个关键环节的“守门人”，就是转染试剂。
长久以来，全球转染试剂市场被少数国际品牌牢牢占据。研究者们面对高昂的成本、参差不齐的转染效率，以及居高不下的细胞毒性，却往往别无选择。据统计，全球转染试剂及设备市场规模在2025年已达约17.4亿美元，预计到2026年将增长至19.3亿美元，年复合增长率达11.2%，而在中国市场，这一领域同样呈现强劲增长态势，2025年市场规模约为15.73亿元人民币。如此体量的市场中，一款真正实现国产替代的高性能产品，其意义不言而喻。
正是在这样的背景下，一家由留美归国科学家创立于2013年的企业——常州百代生物科技股份有限公司（以下简称“百代生物”），潜心十余年，从底层递送技术做起，逐步构建起覆盖siRNA、质粒DNA、mRNA和蛋白质的全方位转染试剂产品矩阵，正在改变这一细分领域的竞争格局。
一、技术根基：四大递送平台构筑核心竞争力
任何优秀的转染试剂，其背后都是递送技术的长期积累与迭代创新。百代生物自成立以来，始终专注核酸与蛋白质递送机制研究，通过对关键递送成分的精准化合物改造以及多组分的科学优化搭配，成功构建起siRNA、DNA、mRNA、蛋白质四大核心技术平台，成为国内拥有核酸递送核心技术最多的生物公司之一。
二、产品纵深：从明星单品到全场景覆盖
在上述技术平台的支撑下，百代生物构建了以“RFect”和“Lipofect5000”两大系列为核心的转染试剂产品矩阵，覆盖不同分子类型、不同细胞种类和不同应用场景的转染需求。
（一）RFect系列siRNA转染试剂——当之无愧的明星产品线
小核酸（siRNA、miRNA）转染是基因沉默研究的基础，也是百代生物最早切入、市场认可度最高的领域。RFect系列siRNA转染试剂，凭借 “高递送效率+低细胞毒性” 的双重优势，已经确立了其国内siRNA转染试剂中的品牌地位。
尤其值得关注的是第二代产品——RFect V2 siRNA转染试剂。与第一代产品相比，RFect V2实现了几项关键突破：
在转染效率上，部分贴壁细胞的siRNA转染阳性率可高达95%左右，较第一代产品提升5-30%，可完全媲美国际权威转染试剂RNAiMAX。在细胞毒性控制上，RFect V2采用升级版可降解生物纳米材料，转染后细胞死亡率仅约5%，与正常培养条件下细胞死亡率基本一致，大大降低了因细胞毒性对转染结果带来的影响，显著优于RNAiMAX。在操作便捷性层面，RFect V2无需额外购买Opti-MEM等特殊培养基，试剂盒内配套的转染增强剂Trans Enhancer可直接替代无血清培养基用于配制转染复合物，转染6-8小时后也无需换液处理，既降低了操作门槛，又显著提升了实验的可重复性。
针对不同细胞类型，百代生物还推出了多款针对性的产品：RFectPM V2原代细胞siRNA转染试剂专攻难转染且对试剂毒性高度敏感的原代细胞；RFectSP V2悬浮细胞siRNA转染试剂专用于巨噬细胞、淋巴细胞等具有免疫原性的悬浮特性细胞，在部分悬浮细胞中siRNA转染阳性率可达85%左右；RFect Huvec siRNA/miRNA转染试剂针对敏感脆弱且细胞膜不通透的内皮细胞特别研发，在人脐静脉内皮细胞Huvec中的转染阳性率可高达90%左右；Elite Fect-I小核酸活体组织转染试剂则突破性地实现了活体动物脏器及组织的siRNA递送，目标转染脏器和组织包括肝脏、肺脏和肌肉组织等。截至目前，百代生物是国际上少数能够提供活体动物脏器或组织小核酸转染试剂的商业化公司之一。
（二）质粒DNA转染试剂——效率、低毒、便捷的标杆
质粒DNA转染是过表达研究、病毒包装和蛋白纯化实验中的常规操作。百代生物在质粒DNA转染领域构建了梯度化的产品体系，从Lipofect5000到Lipofect9000，产品性能层层递进，覆盖了从常规贴壁细胞到难转染细胞的多元需求。
Lipofect9000作为该系列的旗舰产品，是在Lipofectamine 3000和Lipofect5000基础上研发的全新升级版。它专为难转染细胞的质粒转染而设计，在贴壁培养的AGS细胞中转染阳性率可达90%以上；即使面对带有悬浮特性和免疫原性的巨噬细胞——RAW264.7，转染阳性率也能达到60%以上。产品配方采用升级版可降解生物纳米材料，转染后细胞死亡率仅5%左右，试剂盒内配置的Trans Buffer可在提升质粒转染效率的同时促进蛋白表达，操作上也十分简便。
Lipofect5000 Prime则是一款“双功能”产品，通过添加构象可变性脂质分子，既可高效转染质粒DNA，也可高效转染siRNA、miRNA等小分子核酸。质粒DNA转染阳性率在部分贴壁细胞中可达90%以上，Fam-siRNA转染阳性率可达95%以上。更可贵的是，即使是神经细胞HT-22、N2A、胶质细胞BV2、巨噬细胞Raw264.7、白血病细胞K562、结肠癌细胞HCT116等难转染的“硬骨头”，Lipofect5000 Prime也能取得理想的转染效果。
另外值得特别提及的是百代生物针对特定细胞类型开发的RFect Huvec内皮细胞质粒DNA转染试剂套装。内皮细胞是公认的难转染细胞——对转染试剂毒性敏感，膜通透性低。普通转染试剂往往导致细胞大量死亡而转染效率不佳。RFect Huvec采用了百代生物自主研发的亲和配方，大幅提升了Huvec的质粒转染成功率，转染阳性率可高达70%左右，而同时转染后的细胞死亡率还不到10%。
（三）mRNA转染试剂——乘着mRNA技术的东风
近年来，随着mRNA疫苗的全球应用和mRNA治疗技术的迅猛发展，mRNA转染已成为生物制药和基因治疗研究的关键技术之一。然而，mRNA分子较大、易降解，其高效递送面临独特挑战。
百代生物在mRNA递送技术平台基础上开发了多款针对不同应用场景的mRNA转染试剂，形成了覆盖体外细胞转染和活体组织转染的完整产品线：
在体外细胞转染方面，RFect mRNA转染试剂盒具有优异的转染性能，在贴壁细胞中转染阳性率可达90%以上（如AAV293细胞）。产品采用生物可降解材料配制，转染后细胞死亡率仅约5%，且血清不影响转染效果，操作简便是其突出优势。RFectSP悬浮细胞mRNA转染试剂则专注于悬浮细胞场景，对于常见的难转染细胞RAW264.7，mRNA转染阳性率可达70%以上；在贴壁细胞Hela中更可达85%以上，且价格不及国际权威品牌的30%，性价比优势显著。
在活体动物mRNA转染方面，RFect mRNA活体组织转染试剂专门用于小鼠、大鼠和兔子等活体组织脏器的mRNA介入转染，目标脏器包括肝脏、肺脏、乳腺以及转移瘤、种植瘤、肌肉、骨髓等组织，使用方式为局部注射，操作简便。
（四）蛋白质转染试剂——攻克蛋白递送的技术高地
蛋白转染——将活性蛋白、多肽或多糖直接递送进细胞——广泛应用于蛋白质功能研究、细胞信号传导研究和药物开发。然而，这一领域长期存在的痛点十分突出：国际主流品牌的蛋白转染试剂多为粉末形式，使用前需进行繁琐的溶解步骤，制备过程中还可能接触有毒化学溶剂，操作耗时且对新手极不友好，加上价格高昂，让很多研究者望而却步。
针对这一行业瓶颈，百代生物创新性研发出了RFect蛋白转染试剂。这款产品的突出优势可以概括为以下三点：
第一，即开即用，革新操作体验。 RFect蛋白转染试剂以液体形式提供，无需溶解，彻底摒弃了传统试剂的繁琐步骤，显著简化实验流程，对科研新手尤为友好。
第二，性能卓越，兼顾效率与安全。在贴壁细胞的转染实验中，RFect蛋白转染试剂对白蛋白的转染效率可达90%以上（Hela细胞）。转染范围不仅涵盖蛋白质，还包括多肽和多糖，如抗体、酶、细胞因子、补体、硫酸葡聚糖等。转染后细胞死亡率仅约5%，几乎与正常培养细胞死亡率一致。
第三，配置贴心，自带内参对照。 试剂盒内配备阳性对照——绿色荧光素标记人血清白蛋白（FITC-HSA），研究者可在荧光显微镜下直观判断转染阳性情况，为实验条件优化提供极大便利。
此外，针对重组蛋白表达领域广泛使用的CHO细胞系，百代生物研发了RFect CHO转染试剂与蛋白表达系统I和II，分别适配贴壁培养和悬浮无血清培养两种工艺，为生物制药上游工艺提供了国产化解决方案。
三、市场验证：学术界的“用脚投票”
一个产品是否真正优秀，最终要看它在真实研究场景中的表现。目前，使用RFect系列siRNA转染试剂发表的SCI论文已逾千篇，博硕士论文、中文核心期刊论文已达5000多篇，其中不少发表于《Cell Research》、《Nature Communications》、《ACS Nano》、《Nucleic Acids Research》、《PNAS》、《Trends in Biotechnology》等国际顶级期刊——这说明RFect系列siRNA转染试剂已经获得了国际权威期刊的普遍认可。
具体应用案例更是不胜枚举：
· 北京大学研究团队在探讨NLRP6在牙龈卟啉单胞菌刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）炎症激活中的作用相关研究中，使用RFect小核酸转染试剂将靶向NLRP6的siRNA转染到HUVEC细胞。qRT-PCR结果显示，使用RFect小核酸转染试剂转染后，HUVEC细胞中NLRP6 mRNA的表达可被敲低90%以上。此外，Western Blot结果显示转染后NLRP6蛋白表达量相比对照降低50%左右，相关成果发表于《Journal of Dental Sciences》。
· 北京大学研究团队在探讨NLRC5在牙周炎中的作用及其机制相关研究中，使用RFect siRNA转染试剂将靶向NLRC5的siRNA转染到人牙周膜干细胞中进行敲低实验。Western blot的结果显示，转染后实验组中NLRC5的蛋白表达与对照组相比明显降低。此外，转染荧光标记的siRNA24小时后，PDLSCs胞浆内可见绿色荧光，表明转染效率较高，成果发表于《Journal of Dental Sciences》。
· 中国医学科学院研究团队在探讨基于金属元素钆的纳米颗粒AGuIX增加癌症放射敏感性的作用机理相关研究中，使用RFect siRNA转染试剂将靶向NRF2、SLC7A11和GPX4的siRNA转染到人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞中。转染48小时后，qRT-PCR实验结果显示细胞中相关基因mRNA的表达与阴性对照相比能敲低80%左右。此外，westernblot结果也显示转染后细胞中相关蛋白的表达量相比对照明显减少，相关成果发表于《Journal of Nanobiotechnology》。
· 中国科学院研究团队为了确定TUFM是否参与线粒体DNA氧化性损伤修复，使用RFect小核酸转染试剂将TUFM siRNA转染到人骨肉瘤细胞（U2OS）中，通过western blotting清楚地观察到在转染后的细胞中TUFM表达显著降低。在TUFM敲低后，发现U2OS细胞中的线粒体常见缺失和氧化损伤修复能力显著改变，成果发表于《Nucleic Acids Research》。
· 澳门大学研究团队在探讨改善椎间盘退变的方法相关研究中，使用RFect siRNA转染试剂将靶向髓核组织中乳脂肪球-EGF因子8（MFG-E8）的siRNA转染到原代大鼠髓核细胞中进行敲低实验。qRT -PCR结果显示，转染后实验组中MFG-E8的mRNA表达相比阴性对照组被敲低了95%以上，成果发表于《Nature Communications》。
· 复旦大学研究团队为了阐明源自干细胞的细胞外囊泡（EVs-NSC）抑制神经毒性反应性星形胶质细胞活化的潜在机制，使用RFect小核酸转染试剂将合成的52个在EVs-NSC中富集的miRNA转染到小鼠原代星形胶质细胞，然后进行qPCR 和比较分析，成功筛选出能够抑制星形胶质细胞中神经毒性标志物C3表达的有效候选miRNA，相关成果发表于《Cell Reports》。
四、行业认可：从实验室走向标准制定
百代生物的转染试剂不仅获得了学术界的广泛认可，也得到了产业和政策的充分肯定。公司先后获得常州市龙城英才计划重点资助、科技部中小企业创新基金重点资助；2015年，公司产品“小核酸转染试剂”获得深圳高交会优秀产品奖；2016年，公司获得江苏省“双创计划”资助；2018年，公司入选常州市外国专家引智计划；2020年，公司被评为江苏省高新技术企业；2023年，续评为江苏省高新技术企业。截止目前，公司已先后获得2项国家发明专利授权、3项国家发明专利受理、14项实用新型专利授权及6项实用新型专利受理。
尤为值得一提的是，2024年，百代生物作为专家组组长单位，主持制定了国内首个《siRNA转染试剂性能的分级标准》。这一事件标志着百代生物已从“能做好产品”的产品型企业，进化为“能定义好产品”的标准制定者，是公司技术实力和行业影响力的重要体现。
结语：本土创新的深度与高度
对于科研工作者来说，转染试剂是每天手中不可或缺的“器”；但在这小小一瓶试剂背后，承载的是递送科学十余年的深厚积累，是从含血清转染、原位细胞转染到活体动物转染等一系列技术难题的逐项攻克。百代生物从底层技术研发出发，经过十余年积累，构建起涵盖siRNA、DNA、mRNA、蛋白质的全场景转染试剂产品体系，不仅实现了“国产替代”，更在多项核心性能指标上达到了国际领先水平，为国内生命科学研究提供了更可靠、更具性价比和创新性的工具支持。
据悉，百代生物团队目前正在向第三代转染试剂方向持续研发，并向小干扰核酸新药领域拓展布局。这家来自常州、深耕于合成生物小众赛道的企业，正在用一步一个脚印的实践说明：在一个细分领域做到极致，同样可以赢得整个世界的目光。
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