一、主流建库技术原理
目前 cDNA 文库构建主流包含SMART 技术与Gateway 技术两大体系，泰克生物融合二者优势开展建库工作。
- SMART 技术：1996 年研发，利用反转录酶的模板切换活性，在 RNA 模板 5' 端添加特异性序列，大幅提升全长 cDNA 克隆效率。
- Gateway 技术：1999 年推出，通过在序列两端引入同源重组臂实现无缝克隆，便于载体更换与不同宿主系统间穿梭。
公司创新采用改进型 SMART 技术搭配同源重组方案，兼容两种技术优势，可高效构建各类高质量 cDNA 展示文库。
二、文库分类与定制服务
根据实验需求，可提供均一化 cDNA 文库与非均一化 cDNA 文库两大类型。同时支持客户指定载体建库，客户可自行提供空白质粒及图谱，满足个性化实验设计。依托改良技术体系，该方案既可构建原核 cDNA 文库，也可高效制备真核酵母 cDNA 展示文库，适配多样化实验场景。
三、样品提交要求
为保障文库质量，不同样本需严格按照规范准备、保存及运输，具体要求如下：
- 细胞样本：细胞数量≥2×10⁷，-80℃保存，干冰运输
- 动物 / 植物组织：按技术指导规范取样，-80℃保存，干冰运输
- 总 RNA：总量＞50 μg，电泳条带清晰完整，-80℃保存，干冰运输
四、完整服务流程与周期
Step1：mRNA 制备（周期：1 周）
- 完成总 RNA 提取与 mRNA 纯化，严格开展质量检测，最终交付 RNA、mRNA 质检报告。要求总 RNA 浓度＞0.4 μg/μL、电泳条带清晰。
Step2：cDNA 文库构建（周期：4–5 周）
- 完成 cDNA 合成、接头连接，可选做序列均一化处理；将重组产物接入 pGADT7 酵母载体并完成电转化，扩增得到初级文库。
- 交付标准：初级文库、扩增质粒（＞500 μg）；文库库容＞1×10⁷ CFU/ml，平均插入片段 0.8–1.5 kb；同步提供库容、测序数据及完整实验报告。
Step3：酵母文库转化与鉴定（可选，周期：3–5 周）
- 将初级文库转入酵母超级感受态细胞，完成库容鉴定与单克隆测序。
- 交付标准：酵母 cDNA 文库甘油菌；文库库容＞1×10⁶ CFU/ml，滴度＞2×10⁷ CFU/ml，附带全套实验数据报告。
五、服务核心优势
泰克生物整合成熟建库技术与标准化质控体系，文库库容充足、序列多样性高、稳定性强。从样本处理到文库交付全流程闭环，可灵活适配酵母双杂交、蛋白互作筛选、表面展示等下游实验，以高品质 cDNA 文库，为各类功能筛选研究奠定坚实基础。